Abstract
β-1,4 bağlı ksilopiranozil
rezidülerinden oluşan ksilanın β-1,4 glikozidik bağlarını yıkan ksilanaz, başta
kağıt ve kağıt hamuru endüstrileri olmak üzere tekstil, yem, fırın ve biyoyakıt
endüstrilerinde de geniş potansiyel uygulamalara sahip endüstriyel bir
enzimdir. Bu çalışmada, Kilis 7 Aralık Üniversitesi merkez kampüs toprak
örneğinden ksilanaz üretici Bacillus spp suşlarının izolasyonu ve saflaştırılan
ksilanazın çeşitli endüstrilerdeki uygulanabilirliği araştırılmıştır. Ksilan
içeren sıvı fermantasyon ortamında geliştirilen Bacillus spp suşundan hücre
serbest elde edilen ham ksilanaz preparatına amonyum sülfat ve alkol çöktürme
uygulanarak saflaştırılmıştır. En yüksek total ve spesifik enzim aktivitesi 723
U/L ve 64.81 U/mg olarak ham enzim preparatında saptanmıştır. Ksilanazın
optimum aktivitesi 90°C ve pH 10.6’da belirlenmiştir. Enzimin 90°C sıcaklıkta
15 dakika ön inkübasyonu sonrası aktivitenin %167’e kadar arttığı saptanmıştır.
Karakterizasyon çalışmalarındaki en yüksek aktivitesi 2935 U/L olarak hesaplanmıştır.
SDS-PAGE ve zimogram analizlerinde, kısmi saflaştırılmış ekstraselüler
ksilanaza ait ortalama 38.75 kDa moleküler ağırlığında tek protein bandı
gözlenmiştir. Ksilanın ksilanaz enzimi ile hidrolizi sonucunda parçalama
ürünleri olarak ksiloz ve ksilo-oligosakkaritler belirlenmiştir.